DESCRIPTION :
Le fer, impliqué dans de nombreux processus biologiques, est indispensable pour les êtres vivants. Bien que très abondant, il est quasiment insoluble dans les conditions de pH et d'aérobiose rencontrées dans les milieux biologiques. Les bactéries ont donc développé différentes voies d'acquisition du fer qui peuvent coexister chez une même espèce. Ainsi certaines bactéries pathogènes secrètent en condition de carence en fer des petites protéines, appelées hémophores, qui leur permettent d'accéder à la plus grande source potentielle de fer chez l'homme, l'hème de l'hémoglobine. Les hémophores ont pour rôle de capter l'hème, libre ou lié à l'hémoglobine, avec une très forte affinité et de le délivrer à un récepteur spécifique de la membrane externe de la bactérie. Seul l'hème est internalisé.
L'unité des systèmes transmembranaires bactériens s'intéresse aux mécanismes moléculaires qui permettent l'internalisation de l'hème par les bactéries, qui ne sont pas encore bien élucidés. La compréhension des différentes étapes de cette voie d'acquisition du fer est importante pour définir une nouvelle stratégie antimicrobienne. Nous étudions dans notre laboratoire des protéines impliquées dans cette voie, du point de vue structural et fonctionnel. Ces protéines sont surexprimées avec de très bon rendement. Elles sont purifiées et étudiées par différentes techniques biochimiques, physico-chimiques et structurales. Le projet d'alternance consiste à la purification et caractérisation d'un complexe protéique membranaire impliqué dans cette voie, puis à étudier sa structure et ses interactions avec d'autres protéines partenaires du système.
Vos missions principales seront les suivantes :
* Mettre en œuvre, ou optimiser un protocole déjà établi en :
-Microbiologie: transformation de bactéries avec des ADN plasmidiques, culture de microorganismes sous pression de sélection, expression de protéines recombinantes
-Biochimie : cassage des cellules, préparation de membranes cellulaires, extraction et solubilisation de protéines membranaires, purification de protéines solubles ou membranaires, plusieurs techniques de chromatographie liquide assistée par un système automatisé (FPLC), analyse des fractions protéiques par SDS-PAGE ou Western-Blot, spectroscopie UV-visible
-Possibilité d'expérience en résonnance magnétique nucléaire et de la cryo miroscopie électronique, ainsi que d'autres techniques biophysiques pour étudier la structure et les interactions moléculaires,…
* Participer à la gestion de laboratoire : commandes, organisation des stocks
Code d'emploi : Ingénieur Biomédical (h/f)
Domaine professionnel actuel : Ingénieurs, Projeteurs et Techniciens de l'Industrie Chimique
Niveau de formation : Bac+3
Temps partiel / Temps plein : Plein temps
Type de contrat : Alternance
Compétences : Analyse des Données, Anglais, Sens de l'Organisation, Fiabilité, Esprit d'Équipe, Recherche, Chromatographie, Systèmes Automatisés, Biochimie, Biologie Molleculaire, Biologie, Biophysique, Ingénierie, Sciences, Hémoglobine, Application des Normes d'Hygiène, Système de Gestion de Laboratoire, Techniques de Laboratoire, Membranes, Microbiologie, Résonance Magnétique Nucléaire, Bactériologie, Inventaire et Contrôle du Stock, Capacités de Démonstration, Protéines
Courriel :
info@pasteur.fr
Téléphone :
0145688000
Type d'annonceur : Employeur direct